荧光成像系统设计与调试实战

📚 共计 30 章节

荧光成像基础

荧光原理 · 显微镜发展史 · 系统组成 · 标记技术概述

光学系统设计

光源选择 · 滤光片组 · 物镜选型与数值孔径

LED/激光二向色镜

相机与探测器

CCD vs sCMOS · 量子效率 · 像素尺寸 · 制冷暗电流

传感器信噪比

光路搭建与调试

光路对准 · 柯勒照明 · 荧光校准 · 杂散光抑制

软件控制与数据采集

SDK二次开发 · 曝光增益 · 多通道时序 · 实时显示

图像预处理

暗场校正 · 平场校正 · 背景扣除 · 图像拼接基础

校正预处理

荧光定量分析

荧光强度测量 · ROI统计 · 时间序列 · FRAP基础

多通道成像

通道串扰补偿 · 多色配准 · 光谱拆分基础

系统性能评估

分辨率 · 灵敏度 · 均匀性 · 时间稳定性测试

常见故障排查

光源衰减 · 噪点过多 · 通道偏移 · 通讯失败

TIRF · 光片荧光 · STORM/PALM概念

超分辨前沿

系统集成与自动化

电动载物台 · 自动对焦 · 多位置 · 流程自动化

自动化集成

TIFF/HDF5 · 元数据 · 备份策略 · LIMS对接

文件格式存储

安全与规范

激光安全 · 化学染料 · 生物防护 · 实验室规范

单色/双色系统搭建 · 活细胞成像系统搭建

荧光探针选择

有机染料 · 荧光蛋白 · 量子点 · 光谱匹配策略

照明系统设计

临界/柯勒照明 · 光斑均匀性 · 光强调节稳定

照明均匀性

二向色镜与滤光片

二向色镜原理 · 透过率曲线 · 滤光片转轮设计

滤光片二向色

物镜与成像

像差校正 · 油镜/空气镜 · 盖玻片厚度影响

相机参数优化

增益与动态范围 · 读出噪声 · 帧率与曝光权衡

同步触发与延时

硬件/软件触发 · 延时精度 · 多设备同步

图像存储与压缩

无损/有损压缩 · JPEG2000 vs TIFF · 实时压缩

图像分析流水线

CellProfiler · ImageJ宏 · scikit-image

荧光寿命成像(FLIM)基础

荧光寿命 · TCSPC · FLIM数据分析

荧光共振能量转移(FRET)

FRET原理 · 受体光漂白 · 敏化发射 · 效率计算

FRET能量转移

荧光标准样品 · 光强/波长/空间校准

微流控与荧光成像

微流控芯片 · 流动检测 · 液滴荧光分析

微流控液滴

深度学习在荧光成像中的应用

图像去噪 · 超分辨重建 · 细胞分割 · 伪影去除

系统维护与保养

光路清洁 · 光源寿命 · 相机维护 · 防震温控

从零搭建宽场荧光显微镜 · 细胞成像